fa جداسازی و کلونینگ سه ژن اپران ژنی پلی‌هیدروکسی بوتیرات تولیدکننده زیست ماده پلاستیکی ‌تخریب‌پذیر اصلاح نباتات General پژوهشي Research پلی‌هیدروکسی بوتیرات (PHB) یک پلی‌هیدروکسی آلکانوات (PHA) است که در باکتری رالستونیا یوتروفا توسط سه آنزیم مسیر بیوسنتزی شامل بتاکتوتیولاز، استو- استیل کوآ- ردوکتاز وابسته به NADPH و PHB سینتاز تولید می‌شود. این سه آنزیم به ترتیب توسط phbA، phbB و phbC کُد می‌شوند. پلی هیدروکسی بوتیرات از لحاظ تجاری بسیار قابل توجه بوده، زیرا به عنوان زیست ماده پلاستیکی ‌تخریب‌پذیر عمل می‌کند به طوری که در شرایط مناسب به طور کامل تجزیه شده و CO2 و آب تولید می‌کند. در این تحقیق اُپران سه ژنی PHB با طراحی پرایمر از ژنوم باکتری جداسازی و خالص‌سازی گردید و پس از کلون‌سازی صحت جداسازی هر سه ژن با PCR داخلی و واکنش‌های هضم آنزیمی اثبات شد. با کلون‌سازی ژن‌های مذکور در حامل بیانی باکتریایی و نیز حامل‌های انتقال ژن انتظار می‌رود بتوان پلیمر پلی‌هیدروکسی بوتیرات را به صورت مقرون به صرفه به عنوان زیست ماده پلاستیکی تخریب‌پذیر در گیاه تولید نمود. Polyhydroxybutyrate (PHB) is a polyhydroxy alkanote (PHA) which produces in ralstonia eutropha by three enzymes, including Beta-ketothiolase, NADPH-dependent acetoacetyl-CoA reductase and PHB synthase. These three enzymes are encoded by phbA, phbB and phbC respectively. There is considerable interest in Polyhidroxybutirate, since it can be used as biodegradable plastic, which under optimal conditions are degraded completely to CO2 and H2O. In this research phb operon was isolated from ralstonia genome using polymerase chain reaction. Specific primers were designed for PHB isolation. The PCR product was purified and cloned. Accuracy of isolation and cloning of three PHB genes were verified by nested PCR and digestion reaction. It is expected that cloning of PHB genes in expression and transformation vectors can be caused to cost effective production of Polyhydroxybutyrate as a bio-degradable plastic in plants. زیست ماده پلاستیکی تخریب‌پذیر، پلی‌هیدروکسی بوتیرات، کلون‌سازی 43 51 http://jcb.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-13&slc_lang=fa&sid=1 مطهره محسن پور 1003194753284600356 1003194753284600356 Yes نادعلی بابائیان جلودار 1003194753284600357 1003194753284600357 No مسعود توحیدفر 1003194753284600358 1003194753284600358 No