fa جداسازی و کلونینگ ژن ایزوفلاون سنتتاز از گیاه سویا رقم ویلیامز III اصلاح نباتات General پژوهشي Research <p><strong>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; ایزوفلاونوییدها، دسته&shy;ای از ترکیبات فلاونوییدی هستند که با استفاده از آنزیم ایزوفلاون سنتاز از پیش&shy;ماده فلاوانونی در گیاهان لگوم تولید می&shy;شوند. مهم</strong><strong><span dir="LTR">&shy;</span></strong><strong>ترین ایزوفلاون&shy;های موجود در گیاه سویا شامل: جنیستین و دیدزین می&shy;باشند که خواص دارویی زیادی دارند. تحقیقات نشان می&shy;دهد که مصرف مرتب این ترکیبات خطر ابتلا به سرطان&shy;های وابسته به هورمون&shy;های جنسی را کاهش داده و کاهش علایم یائسگی، پوکی استخوان، تعدیل کلسترول خون، بهبود بیمای&shy;های کرونری قلبی و غیره</strong> <strong>همگی از مزایای استفاده از این ترکیبات می&shy;باشد. در این پژوهش به&shy;منظور جداسازی ژن 2- هیدروکسی ایزوفلاوانون سنتاز (</strong><strong><span dir="LTR">IFS</span></strong><strong>) ابتدا </strong><strong><span dir="LTR">RNA</span></strong><strong> کل از سویا جداسازی شده و کتاب&shy;خانه </strong><strong><span dir="LTR">cDNA</span></strong><strong> ساخته شد. </strong><strong>ژن </strong><strong><span dir="LTR">&nbsp;IFS</span></strong><strong>با پرایمرهای اختصاصی</strong><strong> با مکان&shy;های برشی </strong><strong><span dir="LTR"><em>Hind</em></span></strong><strong><span dir="LTR">III</span></strong><strong> و </strong><strong><span dir="LTR"><em>Xba</em></span></strong><strong><span dir="LTR">I</span></strong> <strong>از طریق </strong><strong><span dir="LTR">PCR</span></strong><strong> تکثیر گردید و سپس ژن تکثیر شده با اندازه 1566 جفت بازی پس از خالص&shy;سازی از روی ژل در مکان </strong><strong><span dir="LTR"><em>Xba</em></span></strong><strong><span dir="LTR">I</span></strong><strong><span dir="LTR">/</span></strong><strong><em><span dir="LTR">Hind</span></em></strong><strong><span dir="LTR">III</span></strong> <strong>در ناقل بیانی </strong><strong><span dir="LTR">pET28a+</span></strong> <strong>کلون&shy; شد. سپس پلاسمید نو&shy;ترکیب </strong><strong>به</strong><strong> استرین</strong><strong><span dir="LTR">XLI-Blue </span></strong><strong>&nbsp;باکتری </strong><strong><span dir="LTR"><em>E. coli</em></span></strong><strong> منتقل گردید. وجود ژن </strong><strong><span dir="LTR">IFS</span></strong><strong> در </strong><strong>پلاسمید&shy;های نوترکیب با دو روش </strong><strong><span dir="LTR">PCR</span></strong><strong> و هضم آنزیمی مورد تائید قرار گرفت.</strong><strong> در نهایت، حامل مذکور را می&shy;توان برای بیان در داخل پروکاریوت یا با سابکلون کردن مجدد برای انتقال ژن به گیاهان مختلف با روش اگروباکتریوم و تفنگ ژنی مورد استفاده قرار داد.</strong></p> <p>Isoflavonoids are a group of flavonoid compound which produced from flavanon precursors in legums, by isoflavone synthase (IFS) enzyme. The most important isoflavonoids finding in soybean are genistein and daidzein that have many medicinal impacts. Investigations have revealed that regularly using these compounds lowered the risk to come down with hormone-related cancers, besides menopausal symptoms and reduction in osteoprosis, balance in cholesterol bloods level, improving in heart-coronary diseases are benefits that are related to using these compounds. In this investigation in order to isolate isoflavone synthase, at first total RNA was extracted and cDNA was synthesized, subsequently. IFS gene was isolated and subjected to PCR by specific primers which have the <em>HindIII</em> and <em>XbaI</em> at their 5&prime; ends. Subsequently, amplified gene after extracting on agarose gel was cloned in restriction site of <em>XbaI/HnidIII</em> of pET28a⁺. At the last step, recombinant plasmids were approved by PCR and enzymatic digestion. Finally, the mentioned vector can be used either as an expression vector in prokaryotic hosts or introduced into plants by agrobacterium or gene gun-mediated transformations.</p> ترکیبات ایزوفلاونوییدی, جنیستین, کلونینگ, اثرات دارویی, ژن IFS, سویا Cloning, Genistein, IFS Gene, Isoflavonoid Compounds, Medicinal Impacts, Soybean 165 160 http://jcb.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-167&slc_lang=fa&sid=1 امیر آراسته فر 10031947532846004061 10031947532846004061 No علی ریاحی مدوار 10031947532846004062 10031947532846004062 Yes مسعود توحیدفر 10031947532846004063 10031947532846004063 No