fa همسانه سازی و بررسی بیان موقت پیشبر pat1 گیاه سیب زمینی با استفاده از سیستم اگرواینفیلتریشن پژوهشي Research <p> <strong> پیشبرها یکی از عناصر کلیدی مهندسی ژنتیک برای هدفمندی بیان ژن­ها محسوب می­شوند. </strong><strong>به منظور بیان اختصاصی ژن در غده­های سیب­زمینی عمومی­ترین پیشبر مورد استفاده پیشبر </strong><strong><i>Patatin </i></strong><strong>است. </strong><strong>پاتاتین گروهی از گلیکوپروتئین­ها هستند که به وسیله یک خانواده چندژنی رمزسازی می­شوند. این پروتئین­ها بیش از </strong><strong>40% </strong><strong>پروتئین­های </strong><strong>محلول </strong><strong>در غده سیب­زمینی را به خود اختصاص می­دهند. پیشبرهای کلاس </strong><strong>I </strong><strong>به طور عمده مسئول بیان پاتاتین­های غده بوده و بنابراین الگوی بیان اختصاصی برای غده داشته و در بخش بافت پارانشیمی آن به مقدار زیاد وجود دارند. </strong><strong>هدف از این تحقیق همسانه­سازی پیشبر اختصاصی غده </strong><strong>سیب­زمینی </strong>( <strong>پاتاتین کلاس </strong><strong>I </strong>( <a name="OLE_LINK30"></a><a name="OLE_LINK29"><strong><i>pat1 </i></strong></a>)) <strong>و بررسی بیان اختصاصی آن می­باشد. </strong><strong>پس از استخراج </strong><strong>DNA </strong><strong>ژنومی از گیاه سیب­زمینی، پیشبر </strong><strong><i>Pat1 </i></strong><strong>با استفاده از پرایمرهای اختصاصی همسانه­سازی شد. قطعه مورد نظر با دو آنزیم برشی </strong><strong><i>Bam </i></strong><strong>HI </strong><strong>و </strong><strong><i>Hind </i></strong><strong>III </strong><strong>جدا و خالص­سازی شده و جایگزین پیشبر دایمی </strong><strong><i>CaMV35S </i></strong><strong>در ناقل دوگانه </strong><strong><i>pBI121 </i></strong><strong>گردید. پلاسمید نوترکیب به روش شوک حرارتی به </strong><strong><i>Agrobacterium tumefaciens </i></strong><strong></strong><strong>سویه </strong><strong>LBA4404 </strong><strong>منتقل گردید. با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن بیان اختصاصی ژن </strong><strong><i>gus </i></strong><strong>در بافت­های گیاه سیب­زمینی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد که در مقایسه با پیشبر </strong><strong><i>CaMV35S </i></strong><strong>، پیشبر </strong><strong><i>PatI </i></strong><strong>نیز با کارایی بالایی باعث بیان ژن </strong><strong><i>gus </i></strong><strong>در غده­ها می­شود. </strong></p> <p>  To achieve the high level of gene expression, promoters are key elements. Patatin promoter has been used as a specific gene expression in potato tubers. Patatin is a group of glycol protein in potato tuber which is code by a multiple family genes. This protein makes up more than 40% of soluble proteins of potato tubers. Class I Promoters mainly responsible for tuber -specific expression pattern of proteins and located high amount in tuber parenchyma tissue s. The purpose of the present study is the cloning and expression assay of tuber specific promoter, patatin class I (pat1). Total DNA of the potato tissue samples was extracted and the <i>pat1</i> promoter was amplified using specific primers and <i>pfu</i> polymerase by polymerase chain reaction (PCR). The fragment was isolated by two restriction enzymes (<i>Bam</i>HI, <i>Hin</i>dIII) and was replaced with CaMV35S promoter in pBI121 vector. The recombinant plasmid was transferred to <i>Agrobacterium tumefacien</i>s LBA4404 strain using freez-thaw method. The specific expression of <i>gus</i> gene in potato tissue was evaluated using agro-infiltration method. The results of the this experiment confirmed the specific expression of the gene. </p> اگرواینفیلتریشن، بیان موقت، پیشبر patatin، همسانه سازی Agro-infiltration, Cloning, Pat1, Transient expression 93 107 http://jcb.sanru.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2-8&slc_lang=fa&sid=1 ناهید احمدی 100319475328460053 100319475328460053 Yes